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光譜流式細胞儀的調試和校準是怎么進行的

更新時間:2022-06-26      點擊次數:2346
  光譜流式細胞術是一種基于常規流式細胞術的技術,其中光譜儀和多通道檢測器代替了常規系統中的傳統反射鏡,濾光器和光電倍增管。流式細胞儀可以快速進行多參數收集并分析單個細胞或顆粒上的數據。
  光譜流式細胞儀可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學方面的特征參量,并可以根據預選的參量范圍把細胞亞群從中分選出來。儀器采用激光作為激發光源,保證其具有更好的單色性與激發效率;利用熒光染料與單克隆抗體技術結合的標記技術,保證檢測的靈敏度和特異性;用計算機系統對流動的單細胞懸液中單個細胞的多個參數信號進行數據處理分析,保證了檢測速度與統計分析精確性。
  光譜流式細胞儀的調試和校準是怎么進行的:
  在使用前,甚至在使用過程中都要精心進行調試,以保證工作的可靠性和佳性。調試的項目主要是激光強度、液流速度和測量區的光路等。
  激光強度:除調整反射鏡的角度以調整到所需波長的激光出光外,還要結合顯示屏上的光譜曲線使激光的強度輸出為大。
  液流速度:可通過操作臺數字顯示監督,調節氣體壓力大小以獲得穩定的液流速度。
  測量區光路調節:這是調試工作的關鍵。需要保證在測量區的液流、激光束、90散射測量光電系統垂直正交,而且交點較小。一般可在用標準熒光微球等校準中完成。
  流式細胞術中所測得的量是相對值,因此需要在使用前或使用中對系統進行校準或標定,這樣才能通過相對測量獲得的意義。因而FCM中的校準具有雙重功能:儀器的準直調整和定量標度。標準樣品應該穩定,有形成份形狀應是大小比較一致球形,樣品分散性能良好,且經濟、容易獲得。
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